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Crédito: CC0 Public Domain
Os pesquisadores usaram a triagem de alto rendimento das bibliotecas de capsídeos de vetores virais adeno-associados (AAV) para maximizar a probabilidade de obter variantes de AAV com as propriedades desejadas. Como resultado dessas experiências, eles obtiveram idéias inesperadas, relatadas em um artigo publicado na Terapia Gênica Humana.
Mark Kay e colegas da Universidade de Stanford (Stanford, CA) foram coautores do artigo intitulado “Rastreando a evolução do capsídeo do vírus adeno-associado ao sequenciamento da produtividade da coxa”. Os pesquisadores usaram a triagem de alto rendimento das bibliotecas de capsídeos do AAV com código de barras para rastrear a evolução direcionada do capsídeo do AAV. O objetivo final é ser capaz de identificar mais rapidamente os vetores AAV recombinantes aprimorados para uso em ensaios clínicos de terapia genética.
Entre as descobertas mais importantes, está o seguinte: não é essencial o uso de várias rodadas de seleção, e isso pode ser de fato contraproducente. As variantes funcionais e eficientes do AAV foram obtidas após apenas uma rodada de seleção. Além disso, a infecção com uma alta multiplicidade de infecção (MOI) é preferível à infecção com um MOI baixo, pois o uso de MOIs baixos resulta em mais variação entre as telas e não é ideal na seleção dos capsídeos mais desejados. Além disso, a competição pode ocorrer entre os AAVs com capsídeos específicos nas células que. Foram infectados com diferentes AAVs. Outras descobertas importantes estão descritas no artigo.
“Este trabalho de ponta do Dr. Kay e seus colegas de Stanford está ajudando a tornar a evolução dirigida dos capsídeos do AAV menos uma ‘caixa preta'”, diz o editor-chefe Terence R. Flotte, MD, Celia e Isaac Haidak, professor. de Educação Médica e Reitor, Reitor e Vice-Chanceler Executivo da Faculdade de Medicina da Universidade de Massachusetts, Worcester, MA. “Suas idéias provavelmente resultarão na descoberta de novos capsídeos importantes que, de outra forma, poderiam ser negligenciados”.
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Gustavo de Alencastro et al., Rastreando a evolução do capsídeo do vírus adeno-associado por sequenciamento de alto rendimento, Terapia Gênica Humana (2020). DOI: 10.1089 / hum.2019.339
Citação:
Rastreando a evolução do capsídeo do vírus adeno-associado (2020, 18 de março)
consultado em 18 de março de 2020
from https://medicalxpress.com/news/2020-03-tracking-adeno-associated-virus-capsid-evolution.html
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