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Histórico de casos

Uma mulher de 80 anos apresentava história de anemia crônica por deficiência de ferro com causa desconhecida e comorbidades incluíam hipotireoidismo, insuficiência cardíaca congestiva (ICC), estenose aórtica grave e DPOC. A paciente apresentou no pronto-socorro com apresentação inicial com aumento da falta de mama, classe NYHA 3-4. Ela foi internada no hospital para tratamento adicional para ICC, além de hiperventilação, apneia do sono e DPOC. O ferro sérico e a saturação de ferro foram testados e os resultados foram 2 umol / L (intervalo de referência para ferro: 10-29 umol / L) e 7% (intervalo de referência: 14-51%), respectivamente. Parte de suas investigações incluiu um teste fecal qualitativo para rastrear sangramento gastrointestinal. O exame de sangue oculto nas fezes foi realizado com um teste de Hema Screen SpecificTM Teste POCT (Immunostics, Inc, EUA) no laboratório do hospital. O teste Hema Screen Specific é um imunoensaio qualitativo, conjugado com corante sanduíche, que utiliza uma combinação de anticorpos monoclonais e policlonais para detectar o componente globina da hemoglobina nas amostras fecais. O fabricante recomendou o uso do teste Hema Screen Specific em exames físicos de rotina, monitoramento hospitalar de sangramentos em pacientes e para rastreamento de câncer colorretal ou sangramento gastrointestinal de qualquer fonte (declaração do folheto informativo do produto).

A amostra submetida ao laboratório estava marcadamente vermelha (Imagem 1), mas o teste de tela Hema retornou um resultado negativo. Como este dispositivo foi desenvolvido para detectar sangue oculto em amostras fecais, suspeitou-se um efeito de zona, pois as fezes pareciam conter hemorragia aberta. O espécime foi reanalisado com diluições em série por um fator de 5, 10 e a 100 × diluição. O resultado do FIT tornou-se claramente positivo para o sangue (Imagem 2). O paciente recebeu uma colonoscopia, que revelou hemorróidas internas, diverticulose grave no cólon esquerdo, além de múltiplas lesões angiodisplásicas. Uma dessas lesões estava no cólon ascendente e estava sangrando ativamente no momento da colonoscopia. Os demais, que não estavam sangrando, foram distribuídos no cólon ascendente proximal, flexão hepática e cólon transverso proximal. Todas as lesões angiodisplásicas foram tratadas com coagulação plasmática de argônio.

Efeito Prozone no Teste Imunoquímico Fecal (FIT) - Lablogatory 1
Figura 1. Amostra fecal demonstrando hemorragia aberta.
Efeito Prozone no Teste Imunoquímico Fecal (FIT) - Lablogatory 2
Figura 2. Teste imunoquímico fecal realizado na amostra de pacientes submetida. Diluições seriadas da amostra fecal foram realizadas. No fator de diluição de 1: 100, o resultado mostrou positivo. Solução salina foi usada para diluir a amostra fecal.

Além disso, testamos o dispositivo com outra amostra fecal com sangue durante a avaliação inicial. Quando um fator de diluição apropriado foi usado, o efeito prozona começa a perder sua interferência, como mostra a Figura 3.

Efeito Prozone no Teste Imunoquímico Fecal (FIT) - Lablogatory 3
Figura 3. Teste imunoquímico fecal (FIT), mostrando as linhas de controle (C) e teste (T), aplicadas a diluições seriadas da amostra fecal (B − não diluída, C ─ 10 ×, D ─ 100 ×, E ─ 1 000 ×, F ─ 10 000 ×, G ─ 100 000 ×). Na diluição de 10 ×, o efeito da prozona começa a perder sua interferência e, a 100 ×, o teste é claramente positivo. Em diluições superiores a 1 000 ×, a concentração de sangue torna-se muito baixa para retornar um resultado positivo. (Imagem 3 fornecida pelo Dr. Andrew Lyon, PhD, DABCC, FCACB, Laboratório de Medicina e Patologia, Saskatchewan Health Authority)

Discussão

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O efeito prozona (ou efeito Hook) é há muito apreciado como fonte de interferência em imunoensaios.1 Geralmente ocorre em ensaios sanduíche, dos quais o teste FIT é um exemplo.2 Quando a concentração do analito é excessivamente alta, ele satura demais os anticorpos de captura e detecção em favor da formação de complexos anticorpo único: analito, em vez de sanduíches. Isso resulta em um resultado falso negativo, onde o ensaio não consegue detectar o analito. A solução para o efeito prozona é a diluição em série para diminuir a concentração do analito.

O teste FIT foi desenvolvido para detectar quantidades microscópicas de sangue, daí sua função na triagem de sangue oculto nas fezes. Vários laboratórios hospitalares usam esse teste em um ambiente de cuidados intensivos para rastrear sangramentos em pacientes. No entanto, sua capacidade é saturada em amostras contendo hemorragia aberta, como em nosso paciente. Nesses casos, é importante provar que a cor vermelha da amostra é realmente devida ao sangue, pois as fezes vermelhas brilhantes podem ser causadas por uma ampla variedade de fatores alimentares. Alguns exemplos são corantes alimentares vermelhos, beterraba, cranberries e suco de tomate.3 Se essas possibilidades não forem descartadas, o paciente pode ficar sujeito aos riscos de endoscopia desnecessária. A diluição serial da amostra é extremamente útil nesse tipo de situação.

Referências

  1. Dasgupta A, Wahed A. Química Clínica, Imunologia e Controle de Qualidade Laboratorial: Uma Revisão Abrangente para a Preparação da Placa, Certificação e Prática Clínica. Amsterdã: Elsevier; 2014. 2.11.
  2. Allison JE, Fraser CG, Halloran SP, GP jovem. A triagem populacional para câncer colorretal significa obter o FIT: o passado, o presente e o futuro da triagem do câncer colorretal usando o teste imunoquímico fecal para hemoglobina (FIT). Intestino e fígado. Mar 2014; 8 (2): 117-30. https://doi.org/10.5009/gnl.2014.8.2.117
  3. Picco MF. Cor das fezes: Quando se preocupar [Internet]. Clínica Mayo; 2019 19 de fev [cited 2019 Feb 23]. Disponível em: https://www.mayoclinic.org/stool-color/expert-answers/faq-20058080
Efeito Prozone no Teste Imunoquímico Fecal (FIT) - Lablogatory 4

-Hao Li, MD, é atualmente um residente patológico anatômico do primeiro ano na Western University, London ON, Canadá. Antes de ser residente em patologia, ele era residente em neurocirurgia na Universidade de Saskatchewan, Saskatoon SK, Canadá. Quando ele estava na Universidade de Saskatchewan, ele passou o terceiro ano principalmente em neuropatologia, com também algumas patologias anatômicas gerais e patologia clínica. Através dessas experiências, ele percebeu que sua paixão e vocação residiam mais em patologia do que em cirurgia. Ele foi transferido com sucesso para a patologia e iniciou uma nova residência em patologia anatômica em julho de 2019. Com formação em neurociências clínicas, ele espera eventualmente buscar uma bolsa de estudos em neuropatologia e possuir as habilidades necessárias para praticar tanto a patologia anatômica quanto a neuropatologia.

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