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Como você deve se lembrar no mês passado, compartilhei barreiras comuns aos testes de biomarcadores para pacientes com câncer na comunidade. Também comecei a me aprofundar em algumas soluções que já vi implementadas para superar as barreiras. No mês passado, compartilhei soluções que podem ajudar com altos custos e tempos de resposta longos para testes de biomarcadores. Este mês eu gostaria de discutir questões com tecidos, incluindo quantidade.

Aqui estão as 10 principais barreiras que eu já vi nos testes de biomarcadores na comunidade:

  1. Alto custo de teste.
  2. Tempo de resposta longo para obter resultados.
  3. Quantidade limitada de tecido.
  4. Questões pré-analíticas com o tecido.
  5. Baixas taxas de teste de biomarcadores.
  6. Falta de padronização nos testes de biomarcadores.
  7. Disciplinas isoladas.
  8. Baixo reembolso.
  9. Relatórios complexos e longos.
  10. Falta de educação sobre as diretrizes.

Quantidade e qualidade da amostra são importantes ao considerar o teste de biomarcadores. Se não temos material suficiente, não podemos realizar o teste (quantidade insuficiente ou QNS). Se tivermos baixa qualidade, não podemos confiar nos resultados. O velho ditado de lixo no lixo é verdadeiro para os testes de biomarcadores, assim como para todos os outros testes de laboratório.

Começarei com a quantidade de amostras este mês e abordarei os problemas de qualidade no próximo mês. A questão aqui é que uma variedade de tipos de biópsia é realizada em pacientes, dependendo da localização e tamanho de uma massa suspeita. Historicamente, só precisamos de material suficiente para o patologista fazer um diagnóstico. Agora, muitas vezes precisamos de material suficiente para diagnóstico e teste de biomarcadores. Alguns tipos de tumores, como câncer de mama e ovário, produzem material suficiente em locais de fácil acesso para que a quantidade de tecido raramente seja um problema; no entanto, outros tipos de tumor, como câncer de pulmão e pancreático, costuma haver um problema com a quantidade de tecido. Esses tipos de tumor devem ser manuseados com cuidado para garantir que nenhum tecido recuperado seja perdido.

O primeiro passo para resolver a insuficiência tecidual é saber por onde você está começando. Você tem um problema com a taxa de quantidade não suficiente (QNS)? Se você não sabe quantos casos são insuficientes para o teste de biomarcadores, não é possível determinar se há um problema. Se o seu teste for realizado em um laboratório de referência, você poderá solicitar sua taxa de QNS ao laboratório. Eles também podem fornecer a taxa nacional de QNS e, em seguida, você pode se comparar com seus colegas. É importante ter uma taxa QNS precisa, portanto, se houver bloqueios que não sejam enviados ao laboratório de referência, porque o patologista determinou que o bloco está esgotado (não resta tecido), a taxa de QNS fornecida pelo laboratório de referência poderá ser artificialmente baixo.

É importante concordar com o que é QNS. Consideramos um espécime como QNS se não pudermos realizar testes de biomarcadores no bloco. Outros podem considerar o bloco QNS apenas se não houver material suficiente para o diagnóstico. Temos que garantir que haja conteúdo tumoral suficiente no tecido para prosseguir com o teste de biomarcadores. No nosso caso, 10% das células nucleadas (não volume) devem ser tumorais (determinadas pela revisão de patologia de uma lâmina de H&E). Se tivermos tumor suficiente, ainda podemos acabar com um bloqueio QNS devido ao baixo rendimento de DNA e RNA. Então, precisamos de tumor e tecido suficientes.

Aqui está uma breve visão geral das soluções que vi trabalharem para abordar tecidos limitados que podem levar a altas taxas de QNS:

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  • Educação. A pessoa que coleta a biópsia precisa entender quanto material é necessário. Lembre-se de que movemos a trave. Material suficiente para diagnóstico era suficiente no passado, agora precisamos de mais material para realizar testes de biomarcadores. Educar a equipe sobre por que precisamos de mais material é valioso para garantir que material suficiente seja coletado.
  • ROSA. A rápida avaliação no local (ROSE) por um patologista na sala de procedimentos para determinar a suficiência demonstrou diminuir a taxa de repetição da biópsia [1]. O patologista pode garantir que a biópsia esteja sendo coletada em uma região rica em tumores e ajudar a garantir que as áreas de necrose sejam evitadas.
  • Incorporando núcleos separadamente. Frequentemente, obtemos biópsias com agulha básica em amostras de câncer de pulmão. Nós preferimos 3-5 núcleos. É uma prática recomendada incorporar independentemente os núcleos em blocos separados. Também vi laboratórios que incorporam não mais que 2 núcleos em um bloco. Isso permitiria que um bloco fosse conservado para diagnóstico e o outro fosse usado para testes de biomarcadores.
  • Sugestão visual para tecido limitado. Alguém muito mais criativo do que eu desenvolveu um processo em histologia em que, nos casos de tecido limitado, o tecido era incorporado em uma fita vermelha. Essa cor do cassete era uma indicação visual para todos que lidavam com o bloco, limitando o tecido e deve-se tomar cuidado ao encará-lo. Com o tempo, isso evoluiu para um cordão vermelho sendo incorporado ao lado do tecido. Qualquer sugestão visual e um procedimento associado para garantir a conservação do tecido pode ajudar a garantir que estamos conservando o tecido nos casos em que isso for importante.
  • Manchas limitadas de IHC. A principal razão pela qual uma biópsia é realizada é para o diagnóstico. Recomenda-se que o menor número possível de manchas de IHC seja usado para fazer o diagnóstico. Isso conservará o tecido para testes de biomarcadores.
  • Slides não manchados. Cortar 15 a 20 lâminas não coradas é considerado uma prática recomendada em tipos de tumor, como pulmão, onde os testes de biomarcadores serão realizados em 30 dias. O armazenamento a longo prazo de lâminas não manchadas não é recomendado.
  • Reduza o número de vezes que o bloco entra no micrótomo, porque toda vez que o bloco é recolocado no micrótomo, ele deve ser refocado. Isso resulta em tecido desperdiçado. Isso pode ser evitado pensando no futuro e cortando tudo o que você sabe que será necessário enquanto o bloco estiver no micrótomo.

Referências

  1. Collins BT, Murad FM, Wang JF, Bernadt CT. A rápida avaliação no local para biópsia endoscópica com agulha fina guiada por ultrassom do pâncreas diminui a incidência de procedimentos repetidos de biópsia. Cytopathol de Câncer. 2013; 121: 518-24.

-Tabetha Sundin, PhD, HCLD (ABB), MB (ASCP)CM, Tem mais de 10 anos de experiência em laboratório em diagnóstico molecular molecular, incluindo oncologia, genética e doenças infecciosas. Ela é diretora científica de diagnóstico molecular e sorologia da Sentara Healthcare. Dr. Sundin é nomeado Professor Associado Adjunto da Old Dominion University e Professor Assistente da Eastern Virginia Medical School e está envolvido em numerosos esforços para apoiar o campo do diagnóstico molecular.

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